Comment mélanger et utiliser la poudre de peptone mycologique
Comment mélanger et utiliser la poudre de peptone mycologique
Bienvenue dans le monde de la mycologie ! La peptone mycologique est un complément nutritif précieux qui favorise la croissance des champignons et des moisissures. Dans ce guide, nous vous guiderons pas à pas à travers le processus étape par étape de mélange et d'utilisation de poudre de peptone mycologique avec de la gélose ou de la poudre MEA (Malt Extract Agar) pour vos projets de mycologie.
Matériel dont vous aurez besoin :
- Poudre de peptone mycologique
- Poudre d'agar ou d'agar à l'extrait de malt (MEA)
- Eau distillée
- Récipients résistants à la chaleur (par exemple, flacon Erlenmeyer, bocaux en verre)
- Balance
- Tige d'agitation ou agitateur magnétique
- Autoclave ou autocuiseur
- Boîtes de Pétri ou tubes de culture (pour milieux à base d'agar)
Étape 1 : Peser les ingrédients
- Mesurez la quantité souhaitée d’agar ou de poudre de MEA et de peptone mycologique à l’aide d’une balance. Le rapport typique est de 2 à 4 grammes de peptone mycologique pour 20 grammes d’agar ou de poudre de MEA. Ajustez les quantités en fonction de vos besoins spécifiques.
Étape 2 : Mélanger les ingrédients
- Ajoutez la quantité mesurée d’agar ou de poudre de MEA dans le récipient résistant à la chaleur.
- Ensuite, ajoutez la quantité calculée de poudre de peptone mycologique dans le même récipient.
- Remuez doucement le récipient pour mélanger uniformément les ingrédients secs.
Étape 3 : préparation du support
- Maintenant, ajoutez de l'eau distillée dans le récipient en recouvrant le mélange sec. Le rapport général eau/poudre est de 1:10 (par exemple, 100 ml d'eau pour 10 grammes de poudre).
- Remuez soigneusement le mélange avec un agitateur ou utilisez un agitateur magnétique pour vous assurer que la peptone et l'agar/MEA sont entièrement dissous et bien répartis dans l'eau.
Étape 4 : Stérilisation
- Couvrir le récipient avec un couvercle ou du papier d'aluminium pour éviter toute contamination pendant la stérilisation.
- Placez le récipient dans un autoclave ou un autocuiseur et suivez les instructions du fabricant pour la stérilisation. En règle générale, vous devrez faire fonctionner l'autoclave à 121°C (250°F) pendant environ 15 à 20 minutes à une pression de 15 PSI.
- Laissez le mélange refroidir et se solidifier avant de l’utiliser pour la culture.
Étape 5 : Verser les plaques de gélose (si vous utilisez un milieu à base d'agar)
- Préparez vos boîtes de Petri ou tubes de culture en les alignant, prêts à être versés.
- Une fois le mélange agar-peptone refroidi mais encore liquide, versez-le dans les boîtes de Pétri ou les tubes de culture.
- Laissez les médias se solidifier dans les boîtes/tubes, en les laissant tranquilles pendant un certain temps.
Étape 6 : Utilisation des milieux mycologiques
- Le milieu mycologique est désormais prêt à l’emploi. Inoculer les plaques ou les tubes avec les spores fongiques ou la culture de mycélium souhaitée.
- Scellez les boîtes de Pétri avec du Parafilm ou utilisez les bouchons appropriés pour les tubes de culture.
- Conservez les plaques/tubes inoculés dans un endroit sombre et chaud, adapté à la croissance de vos espèces spécifiques de champignons ou de moisissures.
N'oubliez pas de maintenir des pratiques stériles tout au long du processus pour éviter toute contamination. Avec ce milieu mycologique peptone-agar/MEA, vous pourrez cultiver et étudier efficacement divers champignons et moisissures.
Bonne chance dans vos expériences et projets en mycologie !